Hora de publicación: 2022-01-24 Origen: Sitio
Las características del sistema de gestión son que debe tener un propósito claro, una gestión estandarizada, un moderno mecanismo efectivo, un mecanismo eficiente y el desarrollo propio en su conjunto.
Se establecerá un documento SOP bien establecido para especificar el método para lograr diversas actividades de calidad, y cada SOP describirá uno o un grupo de actividades interrelacionadas.
Cada documento SOP describirá los documentos, materiales, personal, registros requeridos para la entrada, transformación y salida del enlace de calidad y su interfaz con las actividades relevantes.
Aclare los requisitos de varios factores en el proceso de conversión de cada enlace, es decir, quién lo hará, qué se hará, qué procedimientos se realizarán, qué requisitos se cumplirán, cómo controlar, qué registros e informes se formarán y los procedimientos de aprobación correspondientes. Acciones correctivas que especifican excepciones o circunstancias especiales que requieren atención en actividades de calidad. Los SOP deben ser concisos, claros y comprensibles y deben ser dominados y estrictamente seguidos por el personal.
Para completar un conjunto de experimentos de PCR, generalmente requiere cuatro procesos experimentales: preparación de reactivos, procesamiento de muestras, amplificación de ácido nucleico y análisis del producto.
Las salas experimentales para los cuatro procesos experimentales deben organizarse adyacentes entre sí para formar un área experimental de PCR independiente. El área experimental de PCR estándar incluye: Área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación, área de análisis de productos, área de tampón de apoyo y corredor público en cada área.
1. Área de preparación de reactivos.
Las principales operaciones en este área experimental son la preparación de reactivos de almacenamiento, el sub-empaque de reactivos y la preparación de la mezcla de reacción principal. Los reactivos y materiales utilizados para la preparación del espécimen deben enviarse directamente a esta área y no deben pasar a través de otras áreas. Las materias primas de reactivo deben almacenarse en esta área, y los reactivos de almacenamiento requeridos deben prepararse en esta área. El área de preparación de reactivos está equipada con un refrigerador de 2 ~ 8 ° C y un refrigerador de -80 ° C, que debe incluirse al calcular la carga de enfriamiento. El área de la habitación debe ser controlada dentro de 15m2 ~ 20m2. Los requisitos de gradiente de presión en esta área son: un estado de presión relativamente positivo para evitar la entrada del aire exterior que contiene aerosoles de ácido nucleico y causa contaminación.
2. Área de preparación del espécimen.
Las principales operaciones en esta área son la preservación de las muestras clínicas, la extracción de ácido nucleico (ARN, ADN), el almacenamiento y la síntesis de ADNc al agregar a los tubos de reacción de amplificación y la medición de ARN.
El área de preparación del espécimen está equipada con un refrigerador de 2 ~ 8 ° C y un refrigerador A -20 ° C, que debe incluirse al calcular la carga de enfriamiento. En el área de preparación del espécimen, también se requiere un gabinete de seguridad biológico para la extracción de ácido nucleico. Para evitar la circulación repetida del ácido nucleico extraído en el gabinete, lo que resulta en la contaminación cruzada entre las muestras y los resultados falsos positivos, el gabinete de seguridad biológico equipado en esta área debe ser de tipo B2. El flujo de aire vertical en el área de trabajo del gabinete de seguridad biológica se encuentra desde el laboratorio, y el aire de escape se filtra por el filtro de alta eficiencia y se descarga directamente al exterior, y no se le permite volver al gabinete de seguridad y al laboratorio. Según la experiencia, si el laboratorio está equipado con gabinetes de seguridad biológica, el área del laboratorio aumentará en 10 m2 para cada conjunto; El área del área de preparación del espécimen debe estar entre 25m2 y 30m2. Se requiere que el gradiente de presión de esta área sea una presión positiva en relación con el área adyacente, a fin de evitar la contaminación por aerosol del área adyacente a esta área.
3. Cámara de amplificación
Las principales operaciones realizadas en esta región son ADN o amplificación de ADNc. Además, la adición de plantillas de ADN preparadas y ADNc sintetizado (desde el área de preparación de la muestra) y la preparación de la mezcla de reacción principal (del área de almacenamiento y preparación de reactivos) en una mezcla de reacción, etc., también se pueden realizar en este área.
La sala de amplificación está equipada principalmente con un instrumento de PCR, el instrumento central del laboratorio de PCR. En el proceso de construcción de laboratorio, es necesario equipar el instrumento de PCR con una fuente de alimentación de UPS especial para garantizar su funcionamiento normal. El área de esta área está controlada a 15m2 ~ 20m2.
Se requiere que el gradiente de presión en esta área sea una presión negativa en relación con el área adyacente para evitar fugas de aerosol de esta área. Para evitar la contaminación causada por aerosoles, se debe minimizar el movimiento innecesario en el área. Las operaciones individuales, como la adición de la muestra, deben realizarse en un banco limpio. Se recomienda usar la presión diferencial de 5 ~ 10PA, que es más fácil de lograr en control.
4. Área de análisis del producto.
La operación principal en esta área es la determinación de fragmentos amplificados. Esta área se puede omitir si el instrumento analítico cerrado automático se utiliza para la detección.
Equipado con una campana de humo en interiores para garantizar una presión negativa relativa en la habitación, y el aire fluye desde el exterior hasta el interior. El área de esta área está controlada a 15 m⊃2; a 20 m⊃2;. Esta área es la principal fuente de contaminación de los productos de amplificación, por lo que el requisito para el gradiente de presión en esta área es: una presión negativa en relación con el área adyacente, a fin de evitar la difusión de productos de amplificación de esta área a otras áreas. Se recomienda usar la presión diferencial de 5 ~ 10PA, que es más fácil de lograr en control.