Hora de publicación: 2022-02-09 Origen: Sitio
La reacción en cadena de la polimerasa es una técnica de biología molecular utilizada para amplificar un fragmento específico de ADN (o ARN). Puede considerarse como una replicación especial de ADN in vitro. La característica más importante de PCR es que puede un aumento sustancial.
PCR (reacción en cadena de polimerasa) utiliza el ADN para convertirse en un solo trenzado cuando se desnaturaliza a una temperatura alta de 95 ° C in vitro. A baja temperatura (a menudo, alrededor de 60 ° C), los cebadores y la cadena simple se combinan de acuerdo con el principio del emparejamiento complementario de la base, y luego se ajustan. La temperatura alcanza la temperatura de reacción óptima de la ADN polimerasa (aproximadamente 72 ° C), y la ADN polimerasa sintetiza hebras complementarias a lo largo de la dirección de fosfato a azúcar de cinco carbonos (5'-3 '). El instrumento de PCR basado en la polimerasa es en realidad un dispositivo de control de temperatura, que puede estar bien controlado entre la temperatura de desnaturalización, la temperatura de la benaturización y la temperatura de extensión.
Un problema central en el diseño de laboratorio de PCR es cómo evitar la contaminación. En el trabajo práctico, los siguientes tipos de contaminación son comunes: la contaminación de los productos de amplificación; contaminación del ADN genómico natural; Contaminación de reactivos y contaminación entre muestras. Por lo tanto, para evitar la contaminación, lo primero que debe hacer es prevenir, no excluir.
El área de trabajo está estrictamente dividida, y cada área experimental debe estar claramente marcada (como los números de la casa llamativos o los diferentes colores del suelo, etc.) para evitar la confusión de equipos, artículos, reactivos, etc. en diferentes áreas experimentales. Configuración razonable del sistema, configuración razonable de aire acondicionado y sistema de ventilación, intente usar un sistema de aire acondicionado con entrega completa y escape completo; Control de presión estricto del flujo de aire para garantizar diferentes requisitos de presión en diferentes áreas experimentales.
Para la operación estandarizada, los técnicos del laboratorio de pruebas de amplificación de genes clínicos deben someterse a una capacitación de inducción. Durante la operación experimental, el operador debe usar guantes y cambiarlos con frecuencia. Limpieza oportuna y correcta. El área debe limpiarse inmediatamente después de que finalice el trabajo experimental.
Gestión estricta: controlar estrictamente al personal que ingresa y abandona el laboratorio. Use ropa de trabajo con signos claramente distinguibles (como diferentes colores) en cada área experimental. Cuando el personal se va, no deben tomar la ropa de trabajo en esta área a otras áreas; Trate de reducir la marcha innecesaria en el área experimental para reducir la posibilidad de la contaminación cruzada. El área de análisis de productos de amplificación es la principal fuente de contaminación del producto de amplificación. El líquido de residuos no se puede verter en el laboratorio. Debe sumergirse en desinfectante y luego descartado del laboratorio. También se deben usar materiales desechables tales como consejos utilizados. Después de ser empapado en desinfectante para desinfección, tratamiento unificado, como la incineración, etc.
La construcción de laboratorios es un tema complejo. No discutimos el tema del personal aquí. La capacitación y precipitación del personal de laboratorio también requiere un proceso. En el proceso de construcción, debemos adaptar medidas a las condiciones locales, no usar Rigor, y descubriremos lentamente qué le convenga de acuerdo con su propia realidad. Desarrollo de ideas de construcción. La construcción científica y racional del laboratorio, mejor juega el papel del laboratorio.